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공전·공정시험법 DB › 식품공전

Biotin(비오틴)(Biotin, 비타민B7) LC-MS

제8. 2.2.2.15 비오틴 — 가. 액체크로마토그래프(육방전환밸브시스템)/자외부검출기 또는 액체크로마토그래프/질량분석기에 의한 정량

컬럼
LC/UV(육방전환밸브) : 전처리컬럼 Capcellpak MF C8 SG80(4.6 mm × 150 mm, 5 μm), 농축컬럼 Capcellpak C18 UG120V(2.0 mm × 35 mm, 5 μm), 분석컬럼 Capcellpak C18 UG120V(1.5 mm × 250 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것. LC/MS : ACQUITY UPLC® BEH(2.1 mm × 100 mm, 1.7 µm) 또는 이와 동등한 것
이동상
LC/UV : 전처리컬럼 이동상 0.01 M 인산이수소칼륨용액, 분석컬럼 이동상 0.01 M 인산이수소칼륨용액/메탄올(90:10, v/v). LC/MS : A — 0.1% 포름산, B — 0.1% 포름산이 함유된 아세토니트릴. 그라디언트(시간 min / A% / B%) : 0.0/100/0 → 5.0/80/20 → 5.2/0/100 → 6.2/0/100 → 7.0/100/0 → 11.0/100/0
유속
LC/UV : 전처리컬럼 500 μL/min, 분석컬럼 100 μL/min. LC/MS : 0.2 mL/min
검출
LC/UV : 자외부검출기(UV) 200 nm. LC/MS : 질량분석기 — Source temperature 120℃, Collision gas N2(질소 또는 비활성기체), Capillary voltage 3.5 kV
주입량
LC/UV 200 μL / LC/MS 2 µL
컬럼온도
LC/MS 40℃ / LC/UV 원문 미명시
이온화
ESI positive
MS 조건
비오틴 Precursor ion 245 → Fragment ion 227, 166
적용범위 : 조제식류 등. 분석원리 : 비오틴을 0.15 M 인산나트륨 완충액(pH 7.0)으로 추출(상온 초음파 5분 → 100℃ 수욕 30분) → 50 mL 정용 → 0℃ 22,000 × g 20분 원심분리 → 여과 → 비오틴용 면역친화성컬럼으로 정제 (PBS 10 mL·증류수 10 mL 세척 후 메탄올 4 mL 용출) → 70℃ 질소 건고 → 0.01 M 인산이수소칼륨 용액(pH 4.8) 1 mL로 재용해. 검체 채취량 약 1∼5 g. 표준원액은 비오틴 표준품(99.9%) 100 mg/L(4℃ 이하 암소 보관). LC/UV에서는 전처리컬럼에서 비오틴 용출시간을 확인해 육방전환밸브 조작시간을 설정한다. 함량은 µg/100 g으로 산출. 정량한계 원문 미명시.

출처: 식품공전 · 식약처 고시 제2026-1호 (시행 2026.1.13. 반영) · 원문 보기

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