공전·공정시험법 DB › 사료공정(사료표준분석방법)

L-글루타민산나트륨 HPLC-UV/PDA/FL

사료표준분석방법 13.9 L-글루타민산나트륨 — 가. 정량법(아미노산분석기) / 나. 질량분석기에 의한 정성 및 정량법

컬럼: [아미노산분석기] HR Na column (4.6 mm × 200 mm) 또는 이와 동등한 것 (양이온교환) / [LC-MS/MS] C18 (4.6 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것
이동상: [아미노산분석기] 완충액: 구연산리튬완충액(Lithium citrate buffer, pH 2.8), 포스트칼럼 반응액: 닌히드린(ninhydrin) 시액 — 닌히드린 18 g + 히드린단틴 0.7 g을 디메틸설폭시드 675 mL에 녹이고 초산리튬시액(pH 5.2) 225 mL 첨가 / [LC-MS/MS] A: 0.1% 포름산 함유 물, B: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴 = 70 : 30 (v/v), 등용매
유속: [아미노산분석기] 완충액 20 mL/h, 닌히드린 시액 25 mL/h (반응기 온도 135℃) / [LC-MS/MS] 0.5 mL/분
검출: [아미노산분석기] 흡광검출기 570 nm (닌히드린 포스트칼럼 반응) / [LC-MS/MS] 질량분석기, Electrospray ionization(positive)
주입량: [아미노산분석기] 40 μL / [LC-MS/MS] 2 μL
컬럼온도: [아미노산분석기] 78℃ / [LC-MS/MS] 40℃
이온화: ESI(positive) — Electrospray ionization(positive)
MS 조건: 글루타민산 RT 3.1분, MW 147.1, 선구이온 m/z 147.8 → 생성이온 84.1(CE -15.0 eV), 102.2(-13.0 eV)

정량한계 — LC-MS/MS법 6 mg/kg (아미노산분석기법은 원문 미명시). [아미노산분석기법] 검체 0.2 g을 구연산리튬완충액(pH 2.2)으로 100 mL 정용 후 1 mL를 50 mL로 희석. [LC-MS/MS법] 적용범위 단미·배합·보조사료. 시료 0.2 g + 증류수 30 mL 진탕 → Biggs-Szijarto 용액(인텅스텐산 12.5 g + 아세트산아연 25 g + 아세트산 20 mL/200 mL) 1 mL 첨가 → 30분 초음파 추출 후 50 mL 정용 → 4,000 G 5분 원심, 상층액 1 mL를 10배 희석 → 디클로로메탄 3 mL 세정 후 0.2 μm 여과. 매질보정 검량선(10~200 μg/L 5수준). 글루타민산나트륨 환산 시 글루타민산량 × 1.149.

출처: 사료공정(사료표준분석방법) · 농림축산식품부 공고 제2025-312호 (시행 2025.7.10. 공고 (사료표준분석방법 2025.6판)) · 원문 보기

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