Folic acid(엽산)(메틸테트라히드로엽산으로서)(제3법) HPLC-UV/PDA/FL

건강기능식품의 기준 및 규격 제4. 3-11-3 엽산(메틸테트라히드로엽산글루코사민)(제3법)

컬럼: 옥타데실실릴화한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충전제 Octadecylsilica) 또는 이와 동등한 것
이동상: A : 인산이수소칼륨 6.8 g을 증류수에 녹여 1 L로 한 뒤 20% 수산화칼륨 용액으로 pH 6.5 조절. B : 인산이수소칼륨 4.08 g을 증류수 650 mL에 녹이고 아세토니트릴 350 mL를 혼합(65 : 35)한 뒤 20% 수산화칼륨 용액으로 pH 8.0 조절. 그라디언트(시간 분 / A% / B%) : 0/100/0 → 15/80/20 → 30/100/0 → 40/100/0
유속: 1.0 mL/min
검출: 포토다이오드어레이(PDA) 검출기 280 nm
주입량: 10 μL
컬럼온도: 32℃

표준물질: 메틸테트라히드로엽산칼슘(L-5-Methyltetrahydrofolate calcium, 분자량 497.5 g/mol, CAS No. 151533-22-1). 메틸테트라히드로엽산으로서 5 mg을 취해 1.5% 아황산나트륨용액 50 mL에 녹여 표준원액으로 하고 같은 용액으로 희석. 전처리: 엽산으로서 약 0.5 mg을 함유하는 시료를 정밀히 취해 1.5% 아황산나트륨 용액 50 mL로 정용 → 20분 초음파 추출 → 2,000 ×g에서 10분 원심분리 → 상등액을 0.2 μm 멤브레인 필터로 여과. 계산: 엽산 함량(mg/100 g) = (C × (a × b)/S) × 0.96 × 100 (0.96 = 메틸테트라히드로엽산의 엽산으로의 전환계수). 정량한계는 원문 미명시. 주의: 원문 조 제목 "엽산(메틸테트라히드로엽산글루코사민)(제3법)"에 '글루코사민'이 잘못 끼어 있는 오기이며, 실제 시험 대상은 메틸테트라히드로엽산이다.

출처: 건강기능식품공전 · 식약처고시 제2026-43호 (시행 2026.6.11. 시행) · 원문 보기

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